Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MAL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403024
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MAL O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MAL, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MAL Anticorpo (E-1): sc-390687
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MAL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403024 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MAL (proteína de mielina e linfócitos) é uma proteína hidrofóbica de membrana com quatro domínios transmembrana, enriquecida em microdomínios de membrana ricos em glicolipídios e colesterol, onde contribui para o tráfego para a membrana apical e para a estabilização da arquitetura epitelial polarizada. Participa de processos de triagem e transporte vesicular que influenciam a organização das junções célula–célula e a distribuição de proteínas de membrana. A expressão de MAL é frequentemente usada como marcador do estado de diferenciação em linhagens epiteliais e tem sido associada a dinâmicas de membrana alteradas em múltiplos contextos de câncer, incluindo relatos de silenciamento epigenético ou expressão desregulada ligada à progressão tumoral e à sinalização relacionada ao sistema imune. Essas propriedades tornam MAL um alvo útil para estudar compartimentalização de membrana, transporte polarizado e fenótipos relacionados à plasticidade epitelial.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MAL (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MAL em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MAL, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MAL na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MAL.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MAL para a investigação da sinalização de MAL, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MAL críticos para a função MAL
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MAL para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MAL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MAL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MAL. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MAL Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MAL (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MAL para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MAL definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.