Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MafG Double Nickase Plasmid (h): sc-401959-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MafG Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MafG Double-Nickase-Plasmid (h) und MafG Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf MAFG abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MafG Double Nickase Plasmid (h) | sc-401959-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MafG Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401959-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAFG kodiert MafG, einen kleinen Maf-bZIP-Transkriptionsfaktor, dem eine Transaktivierungsdomäne fehlt und der vor allem als obligater Dimerisierungspartner für Faktoren der CNC-Familie wie NFE2L2/NRF2 sowie für BACH-Proteine fungiert. Über diese Heterodimere bindet MafG an Maf-Erkennungselemente/Antioxidant-Response-Elemente und reguliert dadurch Antworten auf oxidativen Stress, den Xenobiotika-Stoffwechsel, die Häm-Homöostase sowie umfassendere redox- und entzündungsbezogene Transkriptionsprogramme. Die MafG-Aktivität ist in die KEAP1–NRF2-Signalgebung eingebunden und beeinflusst die zelluläre Anpassung an elektrophilen und metabolischen Stress. Eine dysregulierte MAFG-Expression oder ein verändertes Gleichgewicht zwischen kleinen Maf- und CNC-Faktoren wurde mit Veränderungen in antioxidativen Gennetzwerken in Verbindung gebracht und in Kontexten beobachtet, die für die Krebsbiologie, Neurodegeneration und Mechanismen chronisch-entzündlicher Erkrankungen relevant sind.
MafG Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MAFG-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MAFG abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MAFG-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MAFG-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.