Particules Lentivirales d'Activation (h) MafB: sc-400554-LAC

Le gène humain **MAFB** code MafB, un facteur de transcription à fermeture éclair leucine de type basique (bZIP) appartenant à la famille des grands Maf, qui contrôle la spécification des lignées et les programmes de différenciation terminale. MafB régule l’identité des macrophages et des monocytes, l’ostéoclastogenèse et les fonctions immunitaires des cellules résidentes des tissus en coordonnant des réseaux transcriptionnels impliqués dans la signalisation inflammatoire, la phagocytose et le remodelage de la matrice extracellulaire. Dans le rein, MafB contribue à la maturation et au maintien des podocytes, et sa dérégulation est associée à des défauts de la barrière glomérulaire et à des phénotypes liés aux néphropathies. Une activité altérée de **MAFB** a également été reliée à des états transcriptionnels oncogéniques et à une différenciation aberrante dans des contextes de tumeurs hématologiques et solides, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques centrées sur des voies de signalisation.

Les particules d'activation lentivirales MafB (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de MAFB dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales MafB (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription MAFB, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de MafB. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif MAFB ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.