Plásmido Doble Nickase (h) mAChR M4: sc-402318-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)mAChR M4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa mAChR M4 (h) y el plásmido de doble nickasa mAChR M4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CHRM4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) mAChR M4 | sc-402318-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) mAChR M4 | sc-402318-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHRM4 codifica el receptor muscarínico humano de acetilcolina M4 (mAChR M4), un GPCR acoplado a Gi/o que inhibe la adenilil ciclasa, reduce el AMPc intracelular y modula la actividad de canales iónicos para configurar la excitabilidad neuronal y la transmisión sináptica. La señalización de mAChR M4 se entrecruza con circuitos colinérgicos y dopaminérgicos e influye en vías posteriores como AMPc/PKA y MAPK/ERK, lo que contribuye a la regulación de la liberación de neurotransmisores y la plasticidad. Se ha implicado la expresión alterada de CHRM4 o la función del receptor en la biología de enfermedades neuropsiquiátricas y neurodegenerativas, incluidos mecanismos relevantes para la esquizofrenia, los circuitos de la enfermedad de Parkinson y conductas relacionadas con el consumo de sustancias. Estas características hacen de CHRM4 una diana útil para diseccionar la señalización de GPCR, la neuromodulación a nivel de redes y fenotipos transcripcionales y electrofisiológicos dependientes del receptor en sistemas modelo humanos.
mAChR M4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CHRM4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CHRM4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CHRM4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CHRM4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.