Plasmide Double Nickase (h) MACF1: sc-402923-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MACF1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MACF1 Double Nickase (h) et le plasmide MACF1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MACF1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MACF1 | sc-402923-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MACF1 | sc-402923-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MACF1 (microtubule actin crosslinking factor 1) code une grande spectraplakine qui relie physiquement les microtubules et l’actine filamentaire (F‑actine) afin de coordonner l’architecture du cytosquelette, le transport intracellulaire et la migration cellulaire polarisée. Grâce à ses interactions avec les protéines de suivi de l’extrémité plus et les complexes régulateurs de l’actine, MACF1 favorise la capture des microtubules au niveau du cortex et contribue à des processus tels que le renouvellement des adhésions focales, la croissance des neurites et l’organisation épithéliale. MACF1 a également été impliquée dans la dynamique de la signalisation Wnt/β‑caténine via des fonctions d’échafaudage qui influencent la localisation des composants de la voie. La dérégulation ou les mutations de MACF1 sont associées à des altérations de la motilité cellulaire et à des phénotypes du développement, et ont été rapportées dans des études génomiques portant sur des troubles du neurodéveloppement ainsi que sur le remodelage du cytosquelette lié au cancer.
MACF1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MACF1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MACF1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MACF1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MACF1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.