Plasmide Double Nickase (h) MAB21L: sc-409644-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MAB21L correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MAB21L Double Nickase (h) et le plasmide MAB21L Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MAB21L1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MAB21L | sc-409644-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MAB21L | sc-409644-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAB21L1 code MAB21L, une protéine nucléaire conservée impliquée dans des programmes transcriptionnels qui coordonnent le développement embryonnaire et les décisions de destinée cellulaire, avec une importance particulière pour la morphogenèse oculaire et craniofaciale. Des études fonctionnelles relient les membres de la famille MAB21 à la régulation de la différenciation, de la prolifération et des voies de patterning guidées par des morphogènes, notamment des processus en aval de la signalisation BMP/TGF-β. En génétique humaine, des variants pathogènes de MAB21L1 sont associés à des malformations oculaires congénitales et à des phénotypes développementaux syndromiques, soulignant son rôle au sein des réseaux de régulation génique du développement. Ces caractéristiques font de MAB21L1 une cible pertinente pour disséquer, dans des modèles cellulaires, les mécanismes de spécification de lignée et la biologie des maladies du développement.
MAB21L Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAB21L1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAB21L1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAB21L1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAB21L1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.