M-cadherin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-401232

Übersicht

CDH15 kodiert M‑Cadherin, einen calciumabhängigen Rezeptor für die Zell‑Zell‑Adhäsion, der im Skelettmuskel besonders stark vertreten ist und während der Myogenese und der Muskelregeneration die Erkennung, Ausrichtung und Fusion von Myoblasten unterstützt. Über cadherinvermittelte Zellkontakte sowie die Kopplung an β‑Catenin/p120‑Catenin und das Aktinzytoskelett trägt M‑Cadherin zu kontaktabhängiger Signalübertragung bei, die die Umgestaltung des Zytoskeletts, Migration und Differenzierungsprogramme beeinflusst. Die CDH15‑Aktivität überschneidet sich mit Signalwegen, die die Dynamik von Adhärenskontakten steuern, und kann zelluläre Antworten modulieren, die für Gewebereparatur und Umbauprozesse relevant sind. Eine veränderte Expression von Cadherinen, einschließlich CDH15, wurde in Krankheitskontexten mit Änderungen der Zelladhäsion und des invasiven Verhaltens in Verbindung gebracht, was CDH15 für Studien zu Tumor‑Zell‑Zell‑Interaktionen und muskelassoziierter Pathophysiologie relevant macht.

Das M-cadherin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CDH15-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CDH15-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CDH15 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die M-cadherin-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CDH15-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der M-cadherin-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CDH15-Exone abzielen, die für die M-cadherin-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CDH15-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom M-cadherin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom M-cadherin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CDH15-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das M-cadherin HDR-Plasmid (h) und M-cadherin HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CDH15-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CDH15-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.