Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LZTR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404531
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- LZTR1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico LZTR1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LZTR1 Anticuerpo (E-12): sc-390166
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
LZTR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404531 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
LZTR1 (regulador de la transcripción tipo cremallera de leucina 1) codifica una proteína de la familia BTB-Kelch que se localiza predominantemente en el aparato de Golgi y funciona como adaptador de sustratos para complejos de ligasa E3 de ubiquitina basados en CUL3. Mediante el control dependiente de ubiquitina de la estabilidad proteica, LZTR1 modula la señalización de la vía RAS/MAPK al regular el recambio y la organización espacial de las GTPasas de la familia RAS y de componentes de señalización relacionados. Este gen se vincula a procesos celulares que incluyen la transducción de señales, la proteostasis y el tráfico vesicular, con efectos posteriores sobre programas de proliferación y diferenciación. Alteraciones genéticas en LZTR1 se han asociado con fenotipos relacionados con las RASopatías y con contextos de susceptibilidad tumoral, lo que respalda su relevancia para estudios mecanísticos de la señalización RAS aberrante.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO LZTR1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LZTR1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LZTR1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LZTR1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LZTR1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LZTR1 para la investigación de la señalización de LZTR1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de LZTR1 críticos para la función de LZTR1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LZTR1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido LZTR1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LZTR1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LZTR1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LZTR1 (h) y el plásmido HDR LZTR1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LZTR1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LZTR1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.