Plasmide CRISPR/Cas9 KO LTK (m): sc-421486
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- LTK Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique LTK, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LTK Antibody (B-6): sc-393465
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO LTK (m) | sc-421486 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
La protéine Ltk de la souris code la leucocyte tyrosine kinase (LTK), un récepteur tyrosine kinase qui régule la transduction du signal contrôlant la croissance, la survie et la différenciation cellulaires. L’autophosphorylation de LTK peut activer des cascades de kinases en aval, notamment les voies MAPK/ERK et PI3K/AKT, influençant la prolifération cellulaire et les programmes de réponse au stress. Dans les contextes immunitaire et du système nerveux, LTK a été associée à la spécification des lignages et à la maturation fonctionnelle, ce qui en fait une cible pertinente pour étudier les interactions entre réseaux de récepteurs tyrosine kinases et la signalisation du développement. La dérégulation de la signalisation des RTK, y compris des altérations de l’activité de LTK, est fréquemment étudiée dans des modèles de prolifération aberrante et de transformation, ce qui soutient son utilisation dans des études mécanistiques des circuits de signalisation associés aux maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO LTK (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ltk dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ltk, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ltk à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine LTK.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ltk pour l'étude de la signalisation de LTK, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Ltk essentiels à la fonction de LTK
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ltk pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le LTK plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le LTK plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ltk. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le LTK plasmide HDR (m) et le LTK (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ltk pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ltk définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.