Plasmide Double Nickase (h) LTBP-1: sc-402289-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LTBP-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LTBP-1 Double Nickase (h) et le plasmide LTBP-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LTBP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LTBP-1 Antibody (H-1): sc-271140
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LTBP-1 | sc-402289-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LTBP-1 | sc-402289-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LTBP1 code la protéine 1 de liaison à la forme latente du transforming growth factor bêta (LTBP-1), une glycoprotéine de la matrice extracellulaire qui séquestre et régule les complexes latents de TGF-β, en coordonnant leur dépôt, leur stockage et leur activation dans les tissus conjonctifs. En contrôlant la biodisponibilité spatio-temporelle du TGF-β, LTBP-1 influence la signalisation dépendante de SMAD, le remodelage matriciel, l’adhérence cellulaire et la mécanotransduction au cours du développement et de l’homéostasie tissulaire. Une expression dérégulée de LTBP1 ou une localisation modifiée associée aux microfibrilles peut perturber le niveau d’activité de la voie TGF-β et l’organisation de la matrice extracellulaire, reliant cet axe au remodelage fibrotique, à des phénotypes structuraux vasculaires et cardiaques, ainsi qu’à la biologie du microenvironnement tumoral. LTBP-1 est donc largement étudiée dans les voies qui régissent la plasticité épithélio-mésenchymateuse, le remodelage associé à l’inflammation et les interactions de signalisation entre stroma et parenchyme.
LTBP-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LTBP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LTBP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LTBP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LTBP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.