LSD1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-430289-LAC

Das Mausgen *Kdm1a* kodiert die lysinspezifische Demethylase 1A (LSD1), einen FAD-abhängigen Chromatinregulator, der Mono- und Dimethyl-Markierungen von Histon H3K4 und H3K9 entfernt, um Transkriptionsprogramme zu modulieren. LSD1 wirkt in repressiven und aktivierenden Komplexen wie CoREST und NuRD und ist in die Kontrolle durch RNA-Polymerase II, Enhancer-Dynamiken sowie Netzwerke linienspezifischer Transkriptionsfaktoren eingebunden, wodurch Differenzierung, Zellzyklusprogression und der metabolische Zustand reguliert werden. Über diese epigenetischen Signalwege beeinflusst *Kdm1a* die hämatopoetische und neuronale Entwicklung und trägt zu aberranten Transkriptionsschaltkreisen bei, die für die Krebsbiologie und neuroentwicklungsbezogene Phänotypen relevant sind. Seine zentrale Rolle im Chromatin-Remodeling macht *Kdm1a* zu einem wichtigen Knotenpunkt für die Untersuchung der epigenetischen Kontrolle der Genexpression in Mausmodellen.

LSD1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Kdm1a-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

LSD1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Kdm1a-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen LSD1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Kdm1a-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.