LRRK2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402602-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LRRK2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LRRK2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LRRK2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LRRK2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LRRK2 Anticorpo (133AT1218): sc-130159
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LRRK2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402602-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LRRK2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402602-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O LRRK2 humano codifica a quinase 2 com repetições ricas em leucina (leucine-rich repeat kinase 2), uma quinase serina/treonina e GTPase multifuncional que integra a sinalização em membranas endolisossomais e de tráfego vesicular. O LRRK2 modula a fosforilação de GTPases Rab, a dinâmica do citoesqueleto e a função da via autofagia–lisossomo, influenciando assim a homeostase de organelos e a sinalização inflamatória. A atividade desregulada do LRRK2 e as suas variantes estão fortemente associadas à biologia da doença de Parkinson e também são estudadas em vias de células imunitárias e na neuroinflamação. Como regulador central do tráfego de membranas e da proteostase, o LRRK2 é amplamente utilizado para investigar respostas ao stresse e mecanismos de vulnerabilidade neuronal em modelos celulares humanos.
LRRK2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LRRK2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LRRK2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LRRK2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LRRK2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.