LRRC26 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-432708

Übersicht

Lrrc26 kodiert LRRC26, ein leucinreiches Repeat-enthaltendes Hilfsprotein, das die Gating-Eigenschaften großleitender, Ca2+- und spannungsaktivierter Kaliumkanäle (BK-Kanäle) moduliert. Indem LRRC26 die Aktivierung von BK-Kanälen zu physiologischeren Membranpotenzialen verschiebt, beeinflusst es die Membranerregbarkeit, die Dynamik der Ca2+-Signalübertragung sowie epithelialen Ionentransport. Diese regulatorische Funktion verknüpft LRRC26 mit Signalwegen, die den Tonus glatter Muskulatur, die Funktion sekretorischer Epithelien und die Stimulus‑Sekretions‑Kopplung steuern. Eine veränderte Regulation von BK-Kanälen und die Expression von Hilfsuntereinheiten wurden mit physiologischen Funktionsstörungen in erregbaren und epithelialen Geweben in Verbindung gebracht, was den Einsatz von Lrrc26-Modellen zur Untersuchung von Mechanismen unterstützt, die für Kanalopathien und die Gewebehomöostase relevant sind.

Das LRRC26 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Lrrc26-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Lrrc26-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Lrrc26 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die LRRC26-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Lrrc26-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der LRRC26-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Lrrc26-Exone abzielen, die für die LRRC26-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Lrrc26-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom LRRC26 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom LRRC26 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Lrrc26-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das LRRC26 HDR-Plasmid (m) und LRRC26 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Lrrc26-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Lrrc26-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.