LRP4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401708

Descripción general

LRP4 (proteína relacionada con el receptor de lipoproteínas de baja densidad 4) es un receptor transmembrana de paso único de la familia de receptores LDL que actúa como correceptor y andamio de señalización en la superficie celular. Es conocido principalmente por regular el desarrollo de la sinapsis neuromuscular mediante la señalización agrina–LRP4–MuSK, coordinando el agrupamiento de los receptores de acetilcolina y la maduración sináptica. LRP4 también modula las salidas de señalización relacionadas con Wnt/β-catenina y BMP al unirse a ligandos extracelulares e influir en la disponibilidad de estas vías en la membrana. Alteraciones genéticas y autoinmunes de LRP4 se han asociado con trastornos de la unión neuromuscular y fenotipos esqueléticos, lo que respalda su importancia en el tráfico de receptores, la organización sináptica y el patrón tisular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO LRP4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LRP4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LRP4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LRP4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LRP4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LRP4 para la investigación de la señalización de LRP4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de LRP4 críticos para la función de LRP4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LRP4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido LRP4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LRP4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LRP4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LRP4 (h) y el plásmido HDR LRP4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LRP4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LRP4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.