Plasmide Double Nickase (h) LMO3: sc-417939-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LMO3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LMO3 Double Nickase (h) et le plasmide LMO3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LMO3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LMO3 Antibody (1A8): sc-517019
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LMO3 | sc-417939-NIC | 20 µg | $410.00 |
LMO3 code un régulateur transcriptionnel de type « LIM-only », constitué principalement de domaines LIM de liaison au zinc, qui agissent comme modules d’interaction protéine–protéine plutôt que comme motifs de liaison directe à l’ADN. En assemblant des complexes multiprotéiques avec des facteurs de transcription et des cofacteurs, LMO3 contribue à façonner des programmes d’expression génique liés à la différenciation neuronale, au guidage axonal et au contrôle, dépendant du contexte, de la prolifération et de la survie. Une expression dérégulée de LMO3 a été rapportée dans plusieurs contextes tumoraux, notamment le neuroblastome et d’autres cancers solides, où elle est souvent associée à des états de différenciation altérés et à des phénotypes invasifs. Ces propriétés font de LMO3 une cible utile pour l’étude des réseaux transcriptionnels du développement, de la reprogrammation oncogénique et des mécanismes de spécification de lignée.
LMO3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LMO3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LMO3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LMO3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LMO3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.