Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
LKB1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400313
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LKB1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LKB1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LKB1 Anticorpo (Ley 37D/G6): sc-32245
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LKB1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400313 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
STK11 codifica a quinase de serina/treonina LKB1, um regulador central da homeostase energética e da polaridade celulares por meio da fosforilação da AMPK e de outras quinases relacionadas da família AMPK. Ao integrar sinais de nutrientes e de estresse, a LKB1 influencia a sinalização de mTOR, a autofagia, o metabolismo mitocondrial e o controle do ciclo celular, além de contribuir para a organização epitelial por meio de complexos de polaridade. A disrupção da sinalização dependente de LKB1 está associada a adaptação metabólica alterada, polaridade comprometida e respostas ao estresse genômico. STK11 é frequentemente estudado em biologia do câncer e em contextos de predisposição hereditária a tumores, nos quais a perda da função de LKB1 remodela o controle do crescimento e as vias metabólicas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LKB1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene STK11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do STK11, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do STK11 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LKB1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de STK11 para a investigação da sinalização de LKB1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) STK11 críticos para a função LKB1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos STK11 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LKB1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LKB1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus STK11. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LKB1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LKB1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia STK11 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo STK11 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.