Lipocalin-15 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-415842

Descripción general

LCN15 codifica la lipocalina-15, un miembro de la familia de las lipocalinas, proteínas secretadas que se unen a ligandos hidrofóbicos pequeños y los transportan, incluidos lípidos y metabolitos similares a los retinoides. Mediante el secuestro y la entrega de ligandos, la lipocalina-15 está en posición de influir en la señalización extracelular, la homeostasis de membrana y la comunicación intercelular en los microambientes tisulares. La expresión alterada de lipocalinas se ha asociado con inflamación, respuestas al estrés metabólico y remodelación epitelial, lo que convierte a LCN15 en un objetivo útil para analizar vías de manejo de lípidos y de adaptación al estrés. El estudio de la función de LCN15 puede aportar información sobre los mecanismos que vinculan a las proteínas transportadoras secretadas con la regulación paracrina y con cambios en el estado celular asociados a enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Lipocalin-15 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LCN15 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LCN15 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LCN15 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Lipocalin-15.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LCN15 para la investigación de la señalización de Lipocalin-15, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de LCN15 críticos para la función de Lipocalin-15
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LCN15 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Lipocalin-15 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Lipocalin-15 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LCN15. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Lipocalin-15 (h) y el plásmido HDR Lipocalin-15 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LCN15 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LCN15 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.