Lipocalin-15 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-415842

Übersicht

LCN15 kodiert Lipocalin-15, ein Mitglied der Lipocalin-Familie sezernierter Proteine, die kleine hydrophobe Liganden binden und transportieren, darunter Lipide und retinoidähnliche Metaboliten. Durch die Bindung und Bereitstellung von Liganden kann Lipocalin-15 extrazelluläre Signalwege, die Membranhomöostase und die interzelluläre Kommunikation in Gewebemikroumgebungen beeinflussen. Eine veränderte Expression von Lipocalinen wurde mit Entzündungen, metabolischen Stressreaktionen und epithelialem Remodeling in Verbindung gebracht, wodurch LCN15 ein nützliches Ziel für die Aufklärung von Lipidverarbeitungs- und stressadaptiven Signalwegen darstellt. Die Untersuchung der LCN15-Funktion kann Mechanismen erhellen, die sezernierte Carrier-Proteine mit parakriner Regulation und krankheitsassoziierten Veränderungen des zellulären Zustands verknüpfen.

Das Lipocalin-15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des LCN15-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des LCN15-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von LCN15 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Lipocalin-15-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von LCN15-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Lipocalin-15-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf LCN15-Exone abzielen, die für die Lipocalin-15-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere LCN15-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Lipocalin-15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Lipocalin-15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des LCN15-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Lipocalin-15 HDR-Plasmid (h) und Lipocalin-15 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von LCN15-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten LCN15-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.