LEREPO4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427290

Descripción general

Zc3h15 codifica la proteína murina LEREPO4, un factor de unión a ARN con dedos de zinc predicho, implicado en la regulación génica postranscripcional, incluido el control de la estabilidad, el procesamiento y la traducción del ARNm. Al determinar el destino del ARN, Zc3h15 está en posición de influir en las salidas transcripcionales dependientes de la señalización y en programas celulares como la proliferación, la diferenciación y las respuestas al estrés. La desregulación de las proteínas de unión a ARN y de los complejos ribonucleoproteicos asociados se relaciona ampliamente con alteraciones en la señalización inmunitaria y fenotipos oncogénicos, lo que convierte a Zc3h15 en un nodo relevante para estudios mecanísticos del control de la expresión génica. En sistemas de modelos de ratón, la perturbación de Zc3h15 puede utilizarse para investigar cómo la regulación centrada en el ARN modula la actividad de vías y las transiciones de estado celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO LEREPO4 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Zc3h15 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Zc3h15 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Zc3h15 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LEREPO4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Zc3h15 para la investigación de la señalización de LEREPO4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Zc3h15 críticos para la función de LEREPO4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Zc3h15 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido LEREPO4 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido LEREPO4 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Zc3h15. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LEREPO4 (m) y el plásmido HDR LEREPO4 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Zc3h15 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Zc3h15 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.