Latrophilin-3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-411703

Übersicht

ADGRL3 kodiert Latrophilin-3, einen Adhäsions‑G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor (GPCR), der im Nervensystem besonders stark vertreten ist und an Zell‑Zell‑Kontaktstellen wirkt, um die Synapsenentwicklung, das Neuritenauswachsen und den Aufbau neuronaler Schaltkreise zu regulieren. Über seine extrazellulären Adhäsionsdomänen und seine GPCR‑Signalübertragungsfähigkeit koppelt Latrophilin-3 extrazelluläre Liganden an intrazelluläre Signalwege, die den Umbau des Zytoskeletts, den Vesikeltransport und die neuronale Konnektivität beeinflussen. Genetische und funktionelle Studien bringen ADGRL3 mit neuroentwicklungsbezogenen und neuropsychiatrischen Phänotypen in Verbindung, was seinen Nutzen als molekularen Ansatzpunkt zur Untersuchung synaptischer Organisation und netzwerkbasierter Signalübertragung unterstreicht. Die experimentelle Untersuchung von ADGRL3 ist daher relevant, um zu verstehen, wie Adhäsions‑GPCR‑Signalgebung zur neuronalen Differenzierung, Erregbarkeit und Aufrechterhaltung von Synapsen beiträgt.

Das Latrophilin-3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ADGRL3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ADGRL3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ADGRL3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Latrophilin-3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ADGRL3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Latrophilin-3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ADGRL3-Exone abzielen, die für die Latrophilin-3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ADGRL3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Latrophilin-3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Latrophilin-3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ADGRL3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Latrophilin-3 HDR-Plasmid (h) und Latrophilin-3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ADGRL3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ADGRL3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.