Latrophilin-1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-408830-LAC

ADGRL1 kodiert Latrophilin-1, einen Adhäsions‑G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor, der extrazelluläre Adhäsionssignale mit intrazellulärer Signalübertragung verknüpft, um die Synapsenentwicklung, das Neuritenauswachsen und die Bildung neuronaler Netzwerke zu regulieren. Durch Interaktionen mit endogenen Liganden und die Kopplung an heterotrimere G‑Proteine beeinflusst Latrophilin-1 Second‑Messenger‑Signalwege sowie die Umgestaltung des Zytoskeletts, die die Zell‑Zell‑Kommunikation prägen. ADGRL1‑assoziierte Signalgebung wurde mit neurodevelopmentalen Phänotypen und veränderter synaptischer Konnektivität in Verbindung gebracht und ist damit relevant für die Untersuchung von Mechanismen, die der Verschaltung von Schaltkreisen und der funktionellen Plastizität zugrunde liegen. Seine Expression und die rezeptorvermittelte Signalübertragung bieten zudem einen gut handhabbaren Ansatzpunkt, um die Biologie von Adhäsions‑GPCRs in humanen neuronalen und Modell‑Zellsystemen zu untersuchen.

Latrophilin-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ADGRL1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Latrophilin-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ADGRL1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Latrophilin-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ADGRL1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.