L3MBTL3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-413649

Übersicht

Das humane Gen **L3MBTL3** kodiert ein Mitglied der Familie der Chromatin-Reader mit *malignant brain tumor*-(MBT)-Domäne, die Methyl-Lysin-Markierungen erkennt und zur transkriptionellen Repression beiträgt. **L3MBTL3** ist an der epigenetischen Regulation beteiligt, indem es die Interpretation von Histonmarkierungen mit der Chromatinkondensation und Genstilllegungsprogrammen verknüpft, die die Zellzykluskontrolle, Differenzierung und die Aufrechterhaltung der Genomstabilität beeinflussen. Es wurde mit der Hämatopoese sowie mit breiteren transkriptionellen Netzwerken in Verbindung gebracht, in denen eine veränderte Chromatinregulation Zellschicksalsentscheidungen und die Proliferationsfähigkeit neu ausrichten kann. Eine Fehlregulation von Chromatin-Readern mit MBT-Domäne, einschließlich **L3MBTL3**, ist relevant für Studien zu onkogenen transkriptionellen Zuständen und anderen Erkrankungen, die durch epigenetische Dysbalancen getrieben werden.

Das L3MBTL3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des L3MBTL3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des L3MBTL3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von L3MBTL3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die L3MBTL3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von L3MBTL3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der L3MBTL3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf L3MBTL3-Exone abzielen, die für die L3MBTL3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere L3MBTL3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom L3MBTL3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom L3MBTL3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des L3MBTL3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das L3MBTL3 HDR-Plasmid (h) und L3MBTL3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von L3MBTL3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten L3MBTL3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.