Plasmide Double Nickase (m) KY peptidase: sc-421366-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) KY peptidase correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide KY peptidase Double Nickase (m) et le plasmide KY peptidase Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ky. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) KY peptidase | sc-421366-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) KY peptidase | sc-421366-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Ky code la peptidase KY, une protéine enrichie dans le muscle impliquée dans le maintien de l’intégrité du muscle squelettique et de l’organisation sarcomérique, jouant un rôle dans la protéostasie et le remodelage structurel lors du stress des fibres musculaires. Chez la souris, l’activité de la peptidase KY est associée à des voies qui régulent l’entretien et le renouvellement des myofibrilles, soutenant une fonction contractile normale et la résistance aux lésions. La perturbation de Ky a été associée à des phénotypes neuromusculaires compatibles avec une pathologie de type dystrophie musculaire, ce qui en fait un gène utile pour étudier les mécanismes des myopathies. La peptidase KY est donc pertinente pour la recherche sur la dégénérescence et la régénération musculaires, ainsi que sur les réseaux de contrôle de la qualité des protéines dans les tissus striés.
KY peptidase Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ky dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ky. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ky. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ky.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.