Kremen-1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-403791-LAC

Humanes **KREMEN1** kodiert **Kremen-1**, einen Single-Pass-Transmembranrezeptor, der als hochaffiner Korezeptor für **Dickkopf-(DKK)-Proteine** fungiert und die kanonische **Wnt/β-Catenin-Signalgebung** moduliert, indem er die Verfügbarkeit von **LRP5/6** an der Zelloberfläche reguliert. Über die DKK-abhängige Bildung von Rezeptorkomplexen und den endozytotischen Transport trägt Kremen-1 dazu bei, Wnt-getriebene Transkriptionsprogramme fein abzustimmen, die Zellschicksalsentscheidungen, Proliferation und Gewebehomöostase steuern. Veränderte KREMEN1-Expression oder der jeweilige Signalgebungskontext können den Output des Wnt-Signalwegs verschieben und wurden in Zusammenhängen untersucht, die mit gestörter Wachstumskontrolle und Entwicklungsprozessen einhergehen. Als membranständiger Regulator der Wnt-Rezeptordynamik ist Kremen-1 relevant für mechanistische Studien zu Signalweg-Crosstalk und zur Biologie der Rezeptor-Internalisierung in krankheitsrelevanten Zellmodellen.

Kremen-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente KREMEN1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Kremen-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der KREMEN1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Kremen-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen KREMEN1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.