Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
KLK7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403539
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- KLK7 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico KLK7, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: KLK7 Anticuerpo (H-5): sc-514447
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
KLK7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403539 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
KLK7 codifica la peptidasa 7 relacionada con calicreínas, una proteasa de serina secretada que contribuye a la homeostasis epidérmica al procesar componentes del estrato córneo y modular la descamación. KLK7 participa en cascadas proteolíticas extracelulares y puede influir en la función de barrera, la adhesión célula–célula y la señalización inflamatoria mediante el clivaje regulado de sustratos proteicos en el microambiente cutáneo. La expresión o actividad desregulada de KLK7 se ha asociado con inflamación cutánea y defectos de barrera, y se investiga con frecuencia en contextos de malignidad epitelial, donde la proteólisis pericelular puede afectar fenotipos relacionados con la invasión. Como resultado, KLK7 se estudia comúnmente en vías que vinculan la actividad de proteasas con la diferenciación, las redes de citocinas y la remodelación de la matriz extracelular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO KLK7 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KLK7 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KLK7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KLK7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KLK7.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KLK7 para la investigación de la señalización de KLK7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de KLK7 críticos para la función de KLK7
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KLK7 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido KLK7 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KLK7 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KLK7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KLK7 (h) y el plásmido HDR KLK7 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KLK7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KLK7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.