KIF20A Lentiviral Activation Particles (h): sc-403194-LAC

KIF20A (Kinesin-Familienmitglied 20A; MKLP2) ist ein mikrotubulusbasierendes Motorprotein, das für den mitotischen Fortschritt erforderlich ist und zentrale Funktionen bei der Organisation der Spindel, der Chromosomentrennung und der Zytokinese übernimmt. Es koordiniert die Dynamik der zentralen Spindel bzw. des Midbodies und ist funktionell mit Netzwerken der Zellzyklusregulation verknüpft, darunter Aurora‑B‑abhängige Signalwege und die RhoA‑gesteuerte Bildung des kontraktilen Rings. Eine fehlregulierte KIF20A-Expression wurde in mehreren Krebskontexten mit proliferativen Phänotypen und einer veränderten mitotischen Genauigkeit in Verbindung gebracht, was KIF20A zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung von Zellteilungsstress und genomischer Instabilität macht. Die experimentelle Modulation von KIF20A ermöglicht die Analyse des Mitoseaustritts, des zeitlichen Ablaufs der Abszission sowie des Zusammenspiels zwischen Mikrotubuli und Aktin in humanen Zellmodellen.

KIF20A Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente KIF20A-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

KIF20A Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der KIF20A-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen KIF20A-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen KIF20A-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.