Plásmido Doble Nickase (h) KIF13A: sc-403751-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)KIF13A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa KIF13A (h) y el plásmido de doble nickasa KIF13A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a KIF13A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) KIF13A | sc-403751-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) KIF13A | sc-403751-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KIF13A codifica un motor de microtúbulos de la familia kinesina-3 que impulsa el transporte dirigido hacia el extremo plus de compartimentos membranosos, moldeando el tráfico vesicular, la dinámica endosomal y la entrega polarizada de carga en células en migración y diferenciación. Al acoplar microtúbulos con vesículas asociadas a Rab y reguladores de la polaridad, KIF13A contribuye a procesos que incluyen el reciclaje de receptores, la remodelación de la membrana y la coordinación del citoesqueleto. La alteración del tráfico vinculado a KIF13A puede modificar la salida de señalización y el posicionamiento de orgánulos, con relevancia para programas celulares como la función inmunitaria, el transporte neuronal y la biología de barreras. Estudios genéticos y funcionales han conectado KIF13A con vías asociadas a enfermedad que implican el transporte intracelular y la desregulación epitelial o inmunitaria, lo que motiva su interrogación mecanística en modelos de células humanas.
KIF13A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus KIF13A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de KIF13A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de KIF13A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con KIF13A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.