KHS CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405817

개요

미토겐 활성화 단백질 키나아제 키나아제 키나아제 키나아제 5(MAP4K5)는 SPS1/STE20 상동 키나아제(kinase homologous to SPS1/STE20, KHS)로도 알려져 있으며, MAPK 신호전달 모듈의 상위에서 기능하는 Ste20 계열의 세린/트레오닌 키나아제입니다. MAP4K5는 JNK 및 관련 경로의 조절을 통해 스트레스 반응성 및 염증성 신호전달에 기여하며, 증식, 세포사멸, 세포골격 역학을 제어하는 전사 프로그램에 영향을 미칩니다. 인간 세포에서 KHS 활성은 선천면역 반응과 대사 신호전달의 조절과 연관되어 MAP4K5를 수용체 매개 신호와 키나아제 연쇄 반응을 통합하는 보다 광범위한 네트워크 내에 위치시키는 것으로 보고되었습니다. 조절 이상이 발생한 MAP4K5 신호는 종양성 경로 재배선 및 염증성 질환 기전과 같은 맥락에서 연구되어 왔으며, 경로 분석을 위한 결절점(node)으로서의 활용 가능성을 뒷받침합니다.

KHS CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MAP4K5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MAP4K5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MAP4K5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 KHS 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 KHS 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MAP4K5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• KHS 기능에 중요한 MAP4K5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MAP4K5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• KHS CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 KHS CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MAP4K5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  KHS HDR 플라스미드 (h) 및 KHS HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MAP4K5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MAP4K5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.