Keratin 81 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405797-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Keratin 81O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Keratin 81 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Keratin 81 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KRT81. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Keratin 81 Anticorpo (36-Z): sc-100929
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Keratin 81 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405797-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Keratin 81 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405797-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KRT81 codifica a queratina 81, uma queratina capilar do tipo II que se associa às queratinas do tipo I para formar filamentos intermediários, conferindo resistência à tração e organização estrutural no epitélio diferenciado do folículo piloso. A queratina 81 contribui para a integridade do citoesqueleto, a mecânica celular e a arquitetura de estruturas queratinizadas por meio de montagem regulada dos filamentos, ligações cruzadas e expressão dependente da diferenciação. Sua função está integrada a programas de diferenciação epitelial e à sinalização de resposta ao estresse, que influenciam a dinâmica dos filamentos e a resiliência do tecido. Alterações na sequência ou na expressão de KRT81 estão associadas a fenótipos de fragilidade da haste capilar e a distúrbios relacionados à formação da fibra do cabelo, tornando-o um alvo relevante para o estudo da biologia das redes de queratina.
Keratin 81 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KRT81 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KRT81. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KRT81. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KRT81 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.