KCTD13 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404120-LAC

KCTD13 (Kaliumkanal‑Tetramerisierungsdomäne‑enthaltend 13) kodiert ein Adaptorprotein mit BTB/POZ‑Domäne, das über Interaktionen mit CUL3‑E3‑Ubiquitin‑Ligase‑Komplexen an der ubiquitinabhängigen Proteostase beteiligt ist. Indem KCTD13 die Ubiquitinierung von Substraten und deren Abbau beeinflusst, kann es zelluläre Prozesse wie Zellzyklusprogression, Zytoskelettdynamik und Signaltransduktionsprogramme modulieren, die die neuronale Entwicklung und synaptische Funktion prägen. Eine veränderte KCTD13‑Dosierung und regulatorische Variation wurden mit neurodevelopmentalen Phänotypen in Verbindung gebracht, einschließlich Merkmalen, die mit Copy‑Number‑Varianten im Bereich 16p11.2 assoziiert sind, was seine Relevanz für Studien zur Gehirnentwicklung und Netzwerk‑Konnektivität unterstreicht. Diese Eigenschaften machen KCTD13 zu einem nützlichen Knotenpunkt, um zu untersuchen, wie ubiquitinvermittelte Regulation neuronale und proliferative Signalwege beeinflusst.

KCTD13 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente KCTD13-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

KCTD13 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der KCTD13-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen KCTD13-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen KCTD13-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.