JunD CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400713

概要

JUNDは、AP-1ファミリーに属する塩基性ロイシンジッパー型転写因子JunDをコードしており、JUNおよびFOSタンパク質と二量体を形成して、刺激応答性遺伝子の発現を制御します。JunDはMAPKシグナル伝達と炎症性シグナルを統合し、プロモーターやエンハンサーの転写調節を介して、細胞周期の進行、分化、酸化ストレス応答、アポトーシスを制御します。さらに、サイトカインや増殖因子の下流にあるクロマチンおよび転写プログラムに関与し、細胞外マトリックスのリモデリングや免疫シグナル伝達などの過程に影響を及ぼします。JunDが関与するAP-1活性の異常は、複数の組織コンテキストにおいて増殖制御の変化、ストレス適応、腫瘍関連表現型と関連づけられており、機序解明を目的とした疾患研究における重要性を示しています。

JunD CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるJUND遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、JUND内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、JUNDのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、JunDタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、JunDシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、JUND欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• JunDの機能に不可欠なJUNDエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、JUNDゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• JunD CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびJunD CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、JUND遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  JunD HDRプラスミド（h）および JunD HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはJUNDホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のJUND標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。