Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
JAK3 Double Nickase Plasmid (h): sc-400835-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das JAK3 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- JAK3 Double-Nickase-Plasmid (h) und JAK3 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf JAK3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: JAK3: sc-6932
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
JAK3 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400835-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JAK3 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400835-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Januskinase 3 (JAK3) ist eine nichtrezeptorassoziierte Tyrosinkinase, die überwiegend in hämatopoetischen Zelllinien exprimiert wird und die Signalübertragung von Zytokinrezeptoren mit nachgeschalteten transkriptionellen Programmen verknüpft. Durch die Assoziation mit der gemeinsamen γ‑Kette (IL2RG) an Rezeptoren für IL‑2, IL‑4, IL‑7, IL‑9, IL‑15 und IL‑21 phosphoryliert JAK3 Rezeptoruntereinheiten und aktiviert STAT‑Faktoren, um die Entwicklung, Proliferation und Differenzierung von Lymphozyten zu koordinieren. Dieser Signalweg überschneidet sich mit übergeordneten immunregulatorischen Netzwerken, darunter PI3K–AKT‑ und MAPK‑Signalgebung, und prägt dadurch Effektorfunktion und Homöostase. Fehlregulierte JAK3‑Signalgebung und genetische Varianten sind mit Immundefizienz‑Phänotypen und aberranter Immunaktivierung verbunden, wodurch JAK3 einen zentralen Knotenpunkt für mechanistische Studien in Immunologie und Entzündung darstellt.
JAK3 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des JAK3-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von JAK3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die JAK3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit JAK3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.