Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Jagged2 Double Nickase Plasmid (h): sc-401322-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Jagged2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Jagged2 Double-Nickase-Plasmid (h) und Jagged2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf JAG2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Jagged2: sc-515725
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Jagged2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401322-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Jagged2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401322-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
JAG2 kodiert Jagged2, einen membrangebundenen Liganden, der an NOTCH-Rezeptoren bindet und juxtakrine Signalübertragung reguliert, die Zellschicksalsentscheidungen, Proliferation und Differenzierung steuert. Eine durch Jagged2 vermittelte NOTCH-Aktivierung beeinflusst Transkriptionsprogramme über RBPJ/CSL-abhängige Zielgene und greift in Signalwege der Entwicklung sowie der Gewebehomöostase ein. Eine dysregulierte JAG2/NOTCH-Signalgebung wurde mit aberranter Linienfestlegung, verändertem Verhalten von Stamm- oder Vorläuferzellen und kontextabhängigen Veränderungen der epithelial–mesenchymalen Dynamik in Verbindung gebracht. Daher wird JAG2 häufig in Modellen der Entwicklung, der Immunbiologie und bei Erkrankungen untersucht, die durch eine gestörte Aktivität des NOTCH-Signalwegs gekennzeichnet sind.
Jagged2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des JAG2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von JAG2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die JAG2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit JAG2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.