Jade-1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-410620-LAC

JADE1 kodiert Jade-1, ein nukleäres PHD-Finger-Protein, das als chromatinassoziierter Regulator der Transkription wirkt, indem es Histonmarkierungen erkennt und über Interaktionen mit HAT-Komplexen wie HBO1 die Histonacetylierung koordiniert. Jade-1 ist an der Kontrolle des Zellzyklus, an DNA-Schadensantworten und an Differenzierungsprozessen beteiligt, indem es die Chromatinzugänglichkeit und Genexpressionsprogramme moduliert. Zudem wurde es mit einer ubiquitinabhängigen Regulation von Signalkomponenten in Verbindung gebracht, einschließlich berichteter Zusammenhänge mit der Modulation des Wnt/β-Catenin-Signalwegs, was Rollen bei der Wachstumskontrolle und der epithelialen Homöostase unterstützt. Veränderte JADE1-Expression oder -Funktion wurde in der Krebsbiologie sowie in der Nieren-assoziierten Pathophysiologie untersucht, wodurch es für Studien zur epigenetischen Regulation und zu Tumorsuppressor-assoziierten Netzwerken relevant ist.

Jade-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente JADE1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Jade-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der JADE1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Jade-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen JADE1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.