Plásmido Doble Nickase (h) ITM2B: sc-403561-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ITM2B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ITM2B (h) y el plásmido de doble nickasa ITM2B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ITM2B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ITM2B Anticuerpo (C-8): sc-374362
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ITM2B | sc-403561-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ITM2B | sc-403561-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITM2B codifica una proteína integral de membrana de la familia de dominios BRICHOS que transita por los sistemas secretor y endolisosomal y se encuentra enriquecida en neuronas. ITM2B contribuye al procesamiento de proteínas de membrana y a la proteostasis, con funciones descritas en la regulación del procesamiento de la proteína precursora del amiloide, el transporte vesicular y la homeostasis celular asociada a neuritas. La alteración de la función de ITM2B se ha vinculado a fenotipos neurodegenerativos, incluidas las demencias familiar británica y familiar danesa, y se ha estudiado en el contexto de la generación de péptidos amiloidogénicos y de respuestas de estrés intracelular. Estas propiedades hacen de ITM2B un objetivo relevante para investigar vías que conectan el tráfico de membrana, el control de calidad proteica y la vulnerabilidad neuronal.
ITM2B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ITM2B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ITM2B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ITM2B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ITM2B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.