Plásmido Doble Nickase (h) ITM2A: sc-406060-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ITM2A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ITM2A (h) y el plásmido de doble nickasa ITM2A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ITM2A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ITM2A | sc-406060-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ITM2A | sc-406060-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITM2A (proteína integral de membrana 2A) es una glicoproteína transmembrana de tipo II de la familia de dominios BRICHOS que se localiza en membranas intracelulares y en la superficie celular, con funciones destacadas en linajes hematopoyéticos y linfoides. Se ha relacionado con la regulación de programas de diferenciación celular y de eventos de señalización asociados a membranas que configuran el desarrollo y la activación de las células inmunitarias. La expresión de ITM2A se estudia a menudo en el contexto del control transcripcional y el compromiso de linaje, incluidas vías que gobiernan la maduración de las células T y la diferenciación específica de tejidos. Se han descrito alteraciones en la abundancia de ITM2A en múltiples contextos relevantes para enfermedades, lo que respalda su uso como un nodo molecular para investigar la desregulación inmunitaria y estados transcripcionales asociados al cáncer.
ITM2A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ITM2A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ITM2A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ITM2A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ITM2A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.