Plasmide Double Nickase (h) ITI-H2: sc-402683-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ITI-H2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ITI-H2 Double Nickase (h) et le plasmide ITI-H2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ITIH2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ITI-H2 | sc-402683-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ITI-H2 | sc-402683-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITIH2 code pour la chaîne lourde 2 de l’inhibiteur inter-α-trypsine (ITI‑H2), une glycoprotéine sécrétée associée à la matrice extracellulaire qui contribue à la stabilisation des matrices riches en hyaluronane via des interactions avec des composants de l’inhibiteur inter‑α et des réactions de transfert apparentées soutenant l’organisation tissulaire. En modulant les propriétés physiques de la matrice péricellulaire, ITI‑H2 influence l’adhérence et la migration cellulaires, ainsi que les processus de remodelage inflammatoire impliqués dans la réponse aux plaies et la biologie du stroma. Une expression ou une maturation altérées des protéines de la famille des inhibiteurs inter‑α, dont ITIH2, ont été rapportées dans des affections inflammatoires et dans de multiples contextes cancéreux, où la composition de la matrice extracellulaire peut façonner l’invasion et le trafic des cellules immunitaires. ITIH2 constitue ainsi un nœud d’étude utile pour explorer les dialogues de signalisation pilotés par la MEC, la régulation des protéases et les phénotypes dépendants du microenvironnement dans des modèles cellulaires humains.
ITI-H2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ITIH2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ITIH2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ITIH2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ITIH2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.