IRF-4 Lentiviral Activation Particles (m): sc-421148-LAC

Das Mausgen *Irf4* kodiert den Interferon-regulatorischen Faktor 4 (IRF-4), einen Transkriptionsfaktor, der Signale aus Antigenrezeptoren und Zytokinen integriert, um die Differenzierung von Lymphozyten sowie deren Effektorprogramme zu steuern. IRF-4 koordiniert Genexpressionsnetzwerke, die an der Klassenwechselrekombination von B-Zellen und der Entwicklung von Plasmazellen beteiligt sind, ebenso wie an der Festlegung von CD4+-T-Zell-Linien und an CD8+-T-Zell-Antworten, und wirkt dabei gemeinsam mit Partnern wie BATF/JUN und NF-κB. Es ist in Signalwege eingebettet, die Immunaktivierung, metabolische Umprogrammierung und Chromatinzugänglichkeit in hämatopoetischen Zellen regulieren. Eine dysregulierte IRF-4-Aktivität wurde mit veränderter Immunhomöostase und entzündungsassoziierten Phänotypen in Verbindung gebracht, was seinen Einsatz in mechanistischen Studien zur Immun-Signalübertragung und zu transkriptionellen Schaltkreisen unterstützt.

IRF-4 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Irf4-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

IRF-4 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Irf4-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen IRF-4-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Irf4-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.