IQGAP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406335

Visão geral

IQGAP3 (proteína ativadora de GTPase contendo motivo IQ 3) é uma proteína de ancoragem (scaffold) que coordena a sinalização e a dinâmica do citoesqueleto ao acoplar pequenas GTPases, fatores reguladores de actina e cascatas de quinases. Ela contribui para a progressão do ciclo celular, a migração direcional e a remodelação de adesões, integrando entradas de vias como MAPK/ERK e a sinalização de GTPases da família Rho para moldar programas de proliferação e motilidade. A expressão desregulada de IQGAP3 tem sido relatada em múltiplos contextos tumorais e é frequentemente estudada por sua associação com maior proliferação, invasividade e alterações em características epiteliais–mesenquimais. Como gene humano, IQGAP3 é amplamente utilizado como um nó para dissecar o controle, em nível de rede, da organização do citoesqueleto e da sinalização mitogênica em modelos mecanísticos de doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IQGAP3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IQGAP3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IQGAP3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IQGAP3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IQGAP3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IQGAP3 para a investigação da sinalização de IQGAP3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IQGAP3 críticos para a função IQGAP3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IQGAP3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo IQGAP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IQGAP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IQGAP3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo IQGAP3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IQGAP3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IQGAP3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IQGAP3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.