Integrin αX/ITGAX/CD11c Lentiviral Activation Particles (m): sc-421170-LAC

Itgax kodiert Integrin αX (CD11c), das mit Integrin β2 (CD18) ein Heterodimer bildet und so den Komplementrezeptor 4 (CR4) erzeugt – einen zentralen Adhäsions- und phagozytotischen Rezeptor auf myeloischen Zelllinien, darunter dendritische Zellen, Makrophagen und bestimmte Monozytensubsets. CD11c ist über Interaktionen mit Liganden wie iC3b und ICAMs an der Leukozytenadhäsion, -migration und der Bildung der immunologischen Synapse beteiligt und verknüpft extrazelluläre Signale mit Zytoskelett-Remodeling und nachgeschalteten Signalwegen, die Antigenaufnahme und -präsentation prägen. In der Mausimmunologie wird ITGAX breit als Marker und funktioneller Regulator der Differenzierung dendritischer Zellen und ihres Gewebetraffickings eingesetzt, mit Relevanz für Entzündungsreaktionen und Immundysregulation in Modellen von Autoimmunität, Infektionen und Tumorimmunologie. Eine Veränderung der Itgax-Expression hilft, Aktivierungszustände myeloischer Zellen, die Funktion antigenpräsentierender Zellen und komplementabhängige Clearance-Mechanismen in vivo und in vitro zu untersuchen.

Integrin αX/ITGAX/CD11c Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Itgax-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Integrin αX/ITGAX/CD11c Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Itgax-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Integrin αX/ITGAX/CD11c-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Itgax-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.