Integrin β6/ITGB6 Double Nickase Plasmid (m): sc-421178-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Integrin β6/ITGB6 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Integrin β6/ITGB6 Double-Nickase-Plasmid (m) und Integrin β6/ITGB6 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Itgb6 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Integrin β6/ITGB6 Double Nickase Plasmid (m) | sc-421178-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin β6/ITGB6 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-421178-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das murine Itgb6 kodiert Integrin β6, eine β‑Untereinheit, die sich mit αv zum auf Epithelien beschränkten Integrin αvβ6 zusammensetzt – einem zentralen Vermittler der Zell–Extrazellulärmatrix-Adhäsion und der Mechanotransduktion. αvβ6 bindet RGD-haltige Liganden wie Fibronectin und latenzassoziierte Peptide, fördert dadurch die Aktivierung von latentem TGF‑β und koppelt an die Fokale-Adhäsionskinase-(FAK)/Src-Signalgebung, welche epitheliales Remodeling, Migration und Differenzierung reguliert. Über integrinabhängige Signalwege und das Crosstalk mit dem TGF‑β‑Signalweg beeinflusst ITGB6 Wundheilungsprogramme, fibrotisches Remodeling sowie Tumor–Stroma-Interaktionen in zahlreichen Geweben. Eine fehlregulierte ITGB6-Expression oder -Funktion wird daher häufig in Modellen der entzündungsgetriebenen Gewebeumgestaltung, Fibrose und epithelialen Tumorprogression untersucht.
Integrin β6/ITGB6 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Itgb6-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Itgb6 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Itgb6-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Itgb6-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.