Plásmido Doble Nickase (m) Integrin β6/ITGB6: sc-421178-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Integrin β6/ITGB6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Integrin β6/ITGB6 (m) y el plásmido de doble nickasa Integrin β6/ITGB6 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Itgb6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Integrin β6/ITGB6 | sc-421178-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Integrin β6/ITGB6 | sc-421178-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino Itgb6 codifica la integrina β6, una subunidad β que se empareja con αv para formar la integrina αvβ6, restringida al epitelio, un mediador clave de la adhesión célula–matriz extracelular y de la mecanotransducción. αvβ6 se une a ligandos que contienen el motivo RGD, como la fibronectina y los péptidos asociados a la latencia, promoviendo la activación del TGF-β latente y el acoplamiento a la señalización de la quinasa de adhesión focal (FAK)/Src, que regula la remodelación, la migración y la diferenciación epiteliales. A través de la señalización dependiente de integrinas y del crosstalk con la vía de TGF-β, ITGB6 influye en programas de reparación de heridas, remodelación fibrótica e interacciones tumor–estroma en múltiples tejidos. Por ello, la expresión o función desregulada de ITGB6 se examina con frecuencia en modelos de remodelación tisular impulsada por la inflamación, fibrosis y progresión del cáncer epitelial.
Integrin β6/ITGB6 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Itgb6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Itgb6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Itgb6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Itgb6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.