Integrin β4/ITGB4/CD104 Lentiviral Activation Particles (m): sc-431434-LAC

Itgb4 kodiert Integrin β4 (ITGB4/CD104), einen lamininbindenden Adhäsionsrezeptor, der mit dem α6-Integrin zu α6β4 dimerisiert, einem zentralen strukturellen Bestandteil von Hemidesmosomen in Epithelgeweben. Über die Kopplung an zytoskelettale und Signaladapter unterstützt α6β4 die Anheftung an die Basalmembran und reguliert Prozesse wie Zellpolarität, Migration und Überleben, mit funktionellen Verbindungen zur Dynamik fokaler Adhäsionen sowie zu PI3K/AKT- und MAPK-assoziierten Signalprogrammen. Eine fehlregulierte ITGB4-Expression oder -Lokalisation wurde in Krebsmodellen mit veränderter epithelialer Integrität und invasivem Verhalten in Verbindung gebracht; zudem wird ITGB4 häufig im Kontext der Haut- und Atemwegsbarriere, der Wundheilung und epithelial–stromaler Interaktionen untersucht.

Integrin β4/ITGB4/CD104 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Itgb4-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Integrin β4/ITGB4/CD104 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Itgb4-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Integrin β4/ITGB4/CD104-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Itgb4-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.