Partículas Lentivirales de Activación (h) Integrin α4/ITGA4/CD49d: sc-401336-LAC

ITGA4 codifica la integrina α4 (CD49d), una subunidad α que forma heterodímeros con β1 (VLA-4) o β7 para generar receptores de adhesión fundamentales para el tráfico leucocitario y el tropismo tisular. Al unirse a ligandos como VCAM1 y la fibronectina, la integrina α4 coordina interacciones célula–célula y célula–matriz que regulan la adhesión firme, la migración transendotelial y la organización de la sinapsis inmunológica. La señalización de ITGA4 se integra con la dinámica de las adhesiones focales y con quinasas aguas abajo, incluidas las vías FAK/Src, PI3K–AKT y MAPK, modulando la remodelación del citoesqueleto y señales de supervivencia en células móviles. La actividad desregulada de la integrina α4 se ha asociado con el reclutamiento de células inflamatorias y con patología inmunomediada, y se estudia ampliamente en neoplasias hematopoyéticas y en procesos metastásicos en los que la adhesión y las interacciones con el nicho influyen en la biología de la enfermedad.

Las partículas de activación lentiviral Integrin α4/ITGA4/CD49d (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de ITGA4 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Integrin α4/ITGA4/CD49d (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción ITGA4, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Integrin α4/ITGA4/CD49d. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo ITGA4 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.