Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421162

概要

Itga4はインテグリンα4（ITGA4/CD49d）をコードしており、β1またはβ7とヘテロダイマーを形成して、α4β1（VLA-4）およびα4β7インテグリンとなるαサブユニットです。これらは細胞―細胞および細胞―マトリックス接着の中心的なメディエーターとして機能します。これらの受容体はVCAM1やフィブロネクチンなどのリガンドに結合し、免疫監視および炎症時における白血球のトラフィッキング、強固な接着、ならびに血管内皮通過移動を協調的に制御します。ITGA4のシグナル伝達は、フォーカルアドヒージョンや細胞骨格リモデリング経路と統合され、遊走、生存、活性化プログラムに影響を与えるとともに、組織内での造血細胞およびリンパ系細胞の局在にも寄与します。α4インテグリン活性の異常は、炎症性・自己免疫性疾患の病態生物学に加え、浸潤や転移性播種を支える腫瘍―間質相互作用の文脈でも広く研究されています。

Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるItga4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Itga4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Itga4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Integrin α4/ITGA4/CD49dタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Integrin α4/ITGA4/CD49dシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Itga4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Integrin α4/ITGA4/CD49dの機能に不可欠なItga4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Itga4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIntegrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Itga4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Integrin α4/ITGA4/CD49d HDRプラスミド（m）および Integrin α4/ITGA4/CD49d HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはItga4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のItga4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。