Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Integrin β3/ITGB3/CD61 Double Nickase Plasmid (m): sc-421175-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Integrin β3/ITGB3/CD61 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Integrin β3/ITGB3/CD61 Double-Nickase-Plasmid (m) und Integrin β3/ITGB3/CD61 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Itgb3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Integrin β3/ITGB3/CD61: sc-365679
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Integrin β3/ITGB3/CD61 Double Nickase Plasmid (m) | sc-421175-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin β3/ITGB3/CD61 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-421175-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das murine Itgb3 kodiert für Integrin β3 (ITGB3/CD61), einen transmembranen Adhäsionsrezeptor, der mit αIIb oder αV zu heterodimeren Integrinen kombiniert, die für die Thrombozytenaggregation, die Zell–Matrix-Adhäsion sowie Outside-in-/Inside-out-Signalgebung zentral sind. ITGB3 reguliert die Dynamik fokaler Adhäsionen und den Umbau des Zytoskeletts über Signalwege einschließlich FAK/Src, PI3K–AKT und Rho-Familien-GTPasen und koordiniert dadurch Migration, Überleben und Mechanotransduktion. In immunologischen und stromalen Kontexten beeinflussen ITGB3-vermittelte Interaktionen mit Liganden der extrazellulären Matrix das inflammatorische Trafficking und die Gewebeumbauprozesse, während veränderte Integrinsignalgebung in experimentellen Modellen mit hämostatischen Funktionsstörungen sowie aberranten Phänotypen der Gefäß- und tumorassoziierten Mikroumgebung in Verbindung gebracht wurde. Diese Eigenschaften machen Itgb3 zu einem wertvollen Ziel für die Untersuchung integrinabhängiger Signalnetzwerke, adhäsionsabhängiger Genregulation und kontextspezifischer Antworten auf biomechanische Reize.
Integrin β3/ITGB3/CD61 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Itgb3-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Itgb3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Itgb3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Itgb3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.