Integrin α2/ITGA2/CD49bCRISPR激活质粒(h): sc-400913-ACT

ITGA2 编码整合素 α2（CD49b），是一种黏附受体，可与整合素 β1 配对形成 α2β1 复合体；该复合体在多种上皮细胞、内皮细胞和免疫细胞类型中是主要的胶原和层粘连蛋白受体。通过将细胞外基质结合与细胞内信号传导耦联，α2β1 可通过包括 FAK/SRC、PI3K–AKT 和 MAPK 在内的通路调控黏着斑组装、细胞骨架重塑以及机械力转导。ITGA2 的活性会影响细胞迁移、血小板黏附和组织重塑；其表达或功能的改变与纤维化、炎症反应以及肿瘤细胞侵袭和转移有关。作为一种表面受体，ITGA2 的信号输出具有情境依赖性，因此常用于细胞外基质生物学、整合素串扰以及细胞–基质相互作用模型的研究。

Integrin α2/ITGA2/CD49b CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ITGA2的表达。

Integrin α2/ITGA2/CD49b CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的ITGA2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于ITGA2转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Integrin α2/ITGA2/CD49b表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的ITGA2位点，并能够研究内源性位点上依赖于Integrin α2/ITGA2/CD49b的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ITGA2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Integrin α2/ITGA2/CD49b通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。