Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Integrin β1/ITGB1 Double Nickase Plasmid (h): sc-400097-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Integrin β1/ITGB1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Integrin β1/ITGB1 Double-Nickase-Plasmid (h) und Integrin β1/ITGB1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ITGB1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Integrin β1/ITGB1: sc-374429
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Integrin β1/ITGB1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400097-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin β1/ITGB1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400097-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGB1 kodiert Integrin β1, eine zentrale Untereinheit, die mit mehreren α-Integrinen Heterodimere bildet und so die Zell–Extrazellulärmatrix-Adhäsion sowie die Mechanotransduktion vermittelt. Über die Kopplung an die fokale Adhäsionskinase (FAK), Kinasen der SRC-Familie, PI3K–AKT- und MAPK-Signalwege reguliert Integrin β1 die Organisation des Zytoskeletts, Polarität, Überleben und Migration. ITGB1-abhängige Interaktionen mit Lamininen, Kollagenen und Fibronectin beeinflussen die Integrität von Epithelien, die Trafficking-Prozesse von Immunzellen und das Verhalten von Stammzellnischen. Eine fehlregulierte ITGB1-Signalgebung und -Trafficking werden häufig im Zusammenhang mit Tumorinvasion und Metastasierung, Fibrose sowie entzündlichem Gewebeumbau untersucht.
Integrin β1/ITGB1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ITGB1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ITGB1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ITGB1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ITGB1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.