Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) IL-8RB: sc-401404-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IL-8RB correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-8RB Double Nickase (h) et le plasmide IL-8RB Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CXCR2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-8RB Antibody (E-2): sc-7304
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IL-8RB | sc-401404-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IL-8RB | sc-401404-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CXCR2 code pour l’IL-8RB, un récepteur couplé aux protéines G des chimiokines CXC ELR+ telles que CXCL8/IL-8, qui régit la chimiotaxie, l’adhésion et l’activation des neutrophiles. La liaison du ligand déclenche la signalisation canonique des GPCR via Gαi, des flux calciques et, en aval, les voies PI3K–AKT, MAPK/ERK et PLCβ, intégrant des signaux qui modèlent le trafic inflammatoire et les interactions avec l’endothélium. L’IL-8RB est impliqué dans la régulation des réponses immunitaires innées, des programmes d’angiogenèse et de cicatrisation, ainsi que dans le dialogue avec les réseaux de cytokines au sein des tissus inflammés. Une signalisation CXCR2 dérégulée est fréquemment étudiée dans les contextes d’inflammation chronique et d’inflammation associée aux tumeurs, où le recrutement myéloïde et les gradients de chimiokines influencent le remodelage du microenvironnement.
IL-8RB Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CXCR2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CXCR2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CXCR2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CXCR2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.