Partículas Lentivirales de Activación (h2) IL-23: sc-401374-LAC-2

El gen humano IL23A codifica la subunidad p19 de la interleucina‑23 (IL‑23), una citocina heterodimérica que se asocia con IL12B (p40) para formar el complejo IL‑23, el cual señaliza a través del receptor de IL‑23 para activar las vías JAK/STAT, en particular STAT3, en células T y poblaciones linfoides innatas. La IL‑23 es un regulador clave de la inmunidad de tipo 17, ya que favorece la diferenciación y el mantenimiento de las células Th17 y promueve programas efectores posteriores que moldean la defensa de la barrera mucosa y las redes de citocinas inflamatorias. La señalización desregulada de IL23A/IL‑23 se ha implicado en la inflamación crónica mediada por el sistema inmunitario, incluyendo la psoriasis, la enfermedad inflamatoria intestinal y la espondiloartritis, vinculando este eje con la inflamación patogénica y la remodelación de los tejidos. Las herramientas de edición génica dirigidas a IL23A y de perturbación funcional se utilizan ampliamente para investigar el ensamblaje de citocinas, la señalización en células presentadoras de antígeno y la dinámica de los circuitos IL‑23/Th17 en modelos celulares y en estudios inmunológicos in vivo.

Las partículas de activación lentiviral IL-23 (h2) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de IL23A en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral IL-23 (h2) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción IL23A, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de IL-23. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo IL23A y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.