Plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-20Rβ (r): sc-437368

Présentation

IL-20Rβ (sous-unité bêta du récepteur de l’interleukine‑20) est une chaîne de récepteur de cytokines de type II qui s’associe à IL‑20Rα ou à IL‑22R1 pour former des complexes récepteurs fonctionnels de l’IL‑19, de l’IL‑20 et de l’IL‑24. La liaison du ligand active la signalisation JAK/STAT, en particulier des programmes transcriptionnels dépendants de STAT3 qui régulent la différenciation épithéliale, la fonction de barrière et l’expression de médiateurs inflammatoires. Dans les tissus de rat, la signalisation liée à IL‑20Rβ est impliquée dans le dialogue entre cellules immunitaires et cellules parenchymateuses lors du remodelage tissulaire et des réponses inflammatoires. La dérégulation de cet axe est fréquemment étudiée dans des contextes tels que l’inflammation cutanée et muqueuse, les voies associées à la fibrose et les modifications de la prolifération et de la survie cellulaires induites par les cytokines.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-20Rβ (r) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène dans les lignées cellulaires rat. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du , ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine IL-20Rβ.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en pour l'étude de la signalisation de IL-20Rβ, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de essentiels à la fonction de IL-20Rβ
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le IL-20Rβ plasmide CRISPR/Cas9 KO (r) et le IL-20Rβ plasmide CRISPR/Cas9 KO (r2) ciblent des sites distincts au sein du locus . Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le IL-20Rβ plasmide HDR (r) et le IL-20Rβ (r2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.