IL-20Rα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405034

Übersicht

IL20RA kodiert die Interleukin‑20‑Rezeptor‑Alpha‑Untereinheit (IL‑20Rα), eine Zytokinrezeptor‑Untereinheit vom Typ I, die mit IL20RB heterodimerisiert und so funktionelle Rezeptoren für IL‑19, IL‑20 und IL‑24 bildet. Die Ligandenbindung aktiviert die JAK/STAT‑Signalübertragung, wobei insbesondere STAT3 und STAT1 phosphoryliert werden, und verknüpft Zytokine der IL‑20‑Familie mit epithelialen und keratinozytären Programmen, die Barrierefunktion, antimikrobielle Antworten und Gewebeumbau regulieren. Die durch IL‑20Rα vermittelte Signalgebung überschneidet sich mit inflammatorischen Netzwerken, die die Expression von Zytokinen und Chemokinen prägen, und kann Proliferations‑ und Differenzierungszustände in responsiven Zelltypen beeinflussen. Eine Dysregulation von IL‑20‑Familien‑Signalwegen wurde mit entzündlichen Hautphänotypen und umfassenderen immunvermittelten Prozessen in Verbindung gebracht, wodurch IL20RA ein nützlicher Ansatzpunkt für mechanistische Studien zur zytokingetriebenen Epithelbiologie ist.

Das IL-20Rα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des IL20RA-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des IL20RA-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von IL20RA nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IL-20Rα-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von IL20RA-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IL-20Rα-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf IL20RA-Exone abzielen, die für die IL-20Rα-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere IL20RA-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom IL-20Rα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom IL-20Rα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des IL20RA-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IL-20Rα HDR-Plasmid (h) und IL-20Rα HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von IL20RA-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten IL20RA-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.